A técnica de montagem Gibson facilita a união eficiente de múltiplos fragmentos de DNA em uma única reação isotérmica. A mistura mestra Gibson Assembly combina exonuclease para criar sobreposições de 3' simples-fios, permitindo o pareamento dos fragmentos na região de sobreposição. A DNA polimerase proprietária preenche lacunas nos fragmentos pareados, enquanto a DNA ligase sela quebras no DNA montado. O resultado é uma molécula de DNA dupla-fita totalmente selada, útil como molde para PCR, RCA e outras aplicações em biologia molecular, incluindo transformação direta. Este método é eficaz para montar oligonucleotídeos, DNA com sobreposições variadas (15-80 pb) e fragmentos longos de até centenas de quilobases.
Uso | MONTAGEM DE DNA |
Tipo de Amostras | DNA |
Aplicações | CLONAGEM |
Processamento | MANUAL |
Marca | NEW ENGLAND BIOLABS |
Condições de Transporte | GELO GEL |
Armazenamento | |
Código do Produto | E5510S |
Registro Anvisa | RUO |
A técnica de montagem gibson permite unir eficientemente múltiplos fragmentos de dna em uma única reação isotérmica. A mistura mestra gibson assembly combina três atividades enzimáticas em um único tampão
apresentação: kit para 10 reações (inclui células competentes)
componentes:
nebuilder positive control -20°c
neb 5-alpha competent e. Coli (high efficiency) -80°c
puc19 vector -20°c
soc outgrowth medium 4°c
gibson assembly master mix -20°c
armazenamento: verificar temperatura. (itens variam entre -80ºc, -20ºc e 4ºc).