Detecção rápida, sensível e precisa de qPCR baseada em sonda e quantificação de alvos de RNA alvo.
O kit NEB Luna Universal Probe RT-qPCR em uma etapa é otimizado para quantificação em tempo real de sequências de RNA alvo usando sondas de hidrólise. Em um único tubo, o RNA é primeiro convertido em cDNA por uma transcriptase reversa e, em seguida, uma DNA polimerase dependente de DNA amplifica o cDNA, permitindo a quantificação via qPCR. O qPCR/RT-qPCR baseado em sonda monitora um aumento na fluorescência após a clivagem da exonuclease 5´ --> 3´ de uma sonda específica do alvo para medir a amplificação de DNA em cada ciclo de uma PCR. Em um ponto onde o sinal de fluorescência é detectado com segurança sobre a fluorescência de background, um ciclo de quantificação ou valor Cq pode ser determinado. Os valores Cq podem ser usados para avaliar a abundância relativa do alvo entre duas ou mais amostras ou para calcular as quantidades absolutas do alvo em referência a uma curva padrão apropriada derivada de uma série de diluições conhecidas.
Características:
- Formatos de master mix convenientes e protocolos amigáveis ao usuário simplificando a configuração da reação
- Corante de rastreamento visível e não e que não interfere na performance ajuda a eliminar erros de pipetagem
- Todos os produtos Luna® foram submetidos a testes rigorosos para otimizar a especificidade, sensibilidade, precisão e reprodutibilidade
- Os produtos têm um desempenho consistente em uma ampla variedade de amostras
- WarmStart RT emparelhado com Hot Start Taq aumenta a especificidade e robustez da reação
O mix de reação em uma etapa da sonda universal Luna é fornecido 2x concentrada e contém DNA polimerase Taq Hot-Start, dNTPs e todos os tampãos necessários. Ele é formulado com um corante de referência passivo exclusivo que é compatível com uma variedade de plataformas de instrumentos, incluindo aquelas que requerem um sinal de referência ROX alto ou baixo. O mix de reação também possui dUTP e um corante visível não fluorescente para monitorar pipetagem da reação. Este corante visível não se sobrepõe espectralmente aos fluoróforos comumente usados em qPCR e não interfere na detecção em tempo real.
O mix enzimático Luna WarmStart RT é fornecido 2x concentrado de 20X e contém Transcriptase Reversa Luna WarmStart, bem como Inibidor de RNase Murino para ajudar na prevenção da degradação do RNA. É compatível com vários tipos de amostra de RNA (RNA total, poli (A) -RNA, etc.).